乳糖胆盐发酵培养基

发布时间：2025-08-18

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一、成分

1. 乳糖：

- 化学式：C12H22O11

- 性质：是一种双糖，由葡萄糖和半乳糖通过β-1,4糖苷键连接而成。易溶于水，具有还原性。

2. 胆盐：

- 常见类型：如牛磺胆酸钠、牛磺鹅去氧胆酸钠等。

- 性质：这些化合物是胆汁中的主要成分，具有表面活性剂的特性，能够乳化脂肪，促进脂溶性维生素的吸收。

3. 蛋白胨：

- 来源：通常通过酶解酪蛋白或肉类获得。

- 性质：富含肽和氨基酸，提供氮源，促进细菌的生长。

4. 牛肉膏：

- 来源：通过加热牛肉提取。

- 性质：含有丰富的氨基酸、多肽、矿物质和维生素，为微生物提供丰富的营养。

5. NaCl：

- 作用：调节渗透压，维持培养基的离子平衡。

6. 中性红：

- 性质：一种pH指示剂，变色范围为pH 6.8至8.0，从红色变为黄色。用于指示培养基的酸碱度变化。

7. 琼脂（如使用）：

- 化学性质：一种多糖类物质，从海藻中提取，常用作固化剂，使液体培养基凝固成固体状态。

二、用途

1. 选择性分离培养基：利用胆盐抑制革兰氏阳性菌的生长，而乳糖作为唯一碳源，可以支持特定肠道细菌（如大肠杆菌）的生长。

2. 鉴定细菌：通过观察细菌在乳糖存在下是否产酸产气，以及是否分解乳糖来判断细菌的种类和特性。例如，大肠杆菌能分解乳糖并产生酸和气体，导致培养基颜色变化和气泡生成。

三、反应机制

1. 乳糖发酵：某些细菌（如大肠杆菌）含有β-半乳糖苷酶，能够分解乳糖生成葡萄糖和半乳糖，进而代谢产生酸（如乳酸）和气体（如二氧化碳）。

2. 胆盐的作用：胆盐对某些细菌具有抑制作用，特别是对革兰氏阳性菌的细胞膜有破坏作用，但对革兰氏阴性菌影响较小。

3. pH指示：中性红作为pH指示剂，当细菌产酸时，培养基的pH下降，颜色由红色变为黄色。这有助于快速判断细菌是否发酵乳糖。

四、配制方法

1. 溶解成分：将蛋白胨、牛肉膏、乳糖、胆盐和NaCl溶解在水中。

2. 调pH值：调整溶液的pH值至7.4±0.2。

3. 灭菌：通常在115℃下高压蒸汽灭菌20分钟。

4. 接种与观察：将待测菌种接种到培养基中，观察是否有气泡产生及培养基颜色变化。

1. GHS分类：

- 无特定GHS分类。

- 根据其成分和使用目的，通常不被视为危险化学品。

2. 安全术语：

- 无特定安全术语。

- 使用时需遵循实验室安全规范。

3. 风险术语：

- 无特定风险术语。

- 避免与皮肤长时间接触，使用后彻底清洗。

4. 急救措施：

- 如不慎进入眼睛，立即用大量清水冲洗至少15分钟，并咨询医生。

- 如误吞食，立即咨询医生，不要催吐。

5. 消防措施：

- 灭火剂：水、泡沫、干粉、二氧化碳。

- 火灾时，佩戴自给式呼吸器。

6. 泄漏应急处理：

- 个人防护：穿戴适当的防护服、手套和眼/面保护。

- 环境保护措施：避免排放到下水道、水体、土壤或空气中。

- 清理方法：使用适当的吸湿材料吸收泄漏物，并作为危险废物处理。

7. 废弃处置：

- 按照当地法规处置。

- 避免排入下水道或环境中。

8. 安全数据表：

- 通常包括产品和公司信息、危害标识、成分/组成信息、急救措施、消防措施、事故泄漏处理措施、操作和储存、暴露控制/个人防护、物理和化学性质、稳定性和反应活性、毒理学信息、生态学信息、处置注意事项、运输信息、法规信息、其他信息等部分。

1. 成分要求

- 蛋白胨：提供氮源，促进细菌生长。

- 牛胆盐：抑制革兰氏阳性细菌的生长，增强对革兰氏阴性细菌的选择性。

- 乳糖：作为唯一碳源，用于检测细菌的发酵能力。

- 溴甲酚紫：作为pH指示剂，用于观察细菌发酵产生的酸。

2. 外观和物理性状

- 颜色：培养基应呈现特定的颜色，如淡黄色或无色，具体取决于配方和生产工艺。

- 透明度：培养基应清澈透明，无明显沉淀或浑浊。

- 均匀性：干粉培养基应混合均匀，无明显分层或结块。

3. pH值

- 初始pH值：培养基的初始pH值应在特定范围内，如7.4±0.2，以确保适宜细菌生长的环境。

- 稳定性：培养基的pH值应在一定储存条件下保持稳定，不易发生显著变化。

4. 无菌性

- 无菌检验：培养基在使用前应进行无菌检验，确保不含任何外来微生物污染。

- 保存条件：培养基应避光、干燥处保存，以防止微生物污染和成分变质。

5. 性能验证

- 质控菌株测试：使用标准质控菌株（如大肠埃希氏菌ATCC25922）接种到培养基中，观察其生长情况和发酵反应是否符合预期。例如，大肠埃希氏菌在乳糖胆盐发酵培养基中应产酸产气，且混浊度达到2度，气体充满管内1/3管以上。

- 选择性验证：使用不发酵乳糖的革兰氏阳性菌（如金黄色葡萄球菌ATCC6538）接种到培养基中，观察其是否被有效抑制。例如，金黄色葡萄球菌在乳糖胆盐发酵培养基中应不生长或仅轻微生长。

6. 包装和标识

- 包装完整性：培养基包装应完好无损，防止外界污染。

- 标识清晰：包装上应清晰标注产品名称、规格、批号、生产日期、有效期及生产厂家等信息。

- 运输和贮存：培养基在运输和贮存过程中应遵循相关规定，确保产品质量不受影响。

7. 法规和标准符合性

- 国家标准：乳糖胆盐发酵培养基的质量指标应符合相关国家标准，如YYT 1190-2010《乳糖胆盐发酵培养基》等。

- 行业标准：除了国家标准外，还应参考相关行业标准和企业标准，确保产品质量满足更高要求。

8. 其他质量指标

- 水分含量：对于干粉培养基而言，水分含量是一个重要的质量指标。过高的水分含量可能导致培养基结块或变质；而过低的水分含量则可能影响培养基的溶解性和使用效果。因此，应控制水分含量在合理范围内。

- 微生物限度：对于非无菌培养基而言，虽然不需要完全无菌但仍需控制微生物限度在一定范围内以确保实验结果的准确性和可靠性。

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