阪崎杆菌显色培养基
发布时间:2025-10-01

一、化学性质
1. 成分:
- 蛋白胨:提供氮源,支持细菌的生长。
- 牛肉提取物:提供维生素和矿物质,促进细菌的增殖。
- 葡萄糖:作为碳源,供能物质。
- 磷酸二氢钾:提供磷源和钾离子,有助于细菌代谢和核酸合成。
- 氯化钠:调节渗透压,维持细胞内外环境的平衡。
- 琼脂:固化剂,使培养基凝固成固体状态,便于菌落的形成和观察。
2. pH值:
- 通常在7.2-7.4之间,适合阪崎杆菌的生长。
3. 显色剂:
- 特定的酶底物或指示剂,能够与阪崎杆菌产生的特定酶反应,导致颜色变化。例如,某些显色培养基含有与β-半乳糖苷酶反应的底物,当阪崎杆菌生长时会产生β-半乳糖苷酶,分解底物并产生颜色变化。
4. 选择性抑制剂:
- 一些抗生素或其他抑制剂,可以抑制其他杂菌的生长,提高检测特异性。例如,头孢他啶和氨曲南常被用来抑制革兰阴性菌。
二、显色机制
1. 酶活性检测:
- 阪崎杆菌具有特定的酶,如β-半乳糖苷酶,能够分解特定的底物,释放出发色基团,导致培养基颜色变化。
- 例如,X-α-GAL培养基中含有5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D-吡喃半乳糖苷,当阪崎杆菌生长时,会分解这种底物并产生蓝色沉淀。
2. 荧光检测:
- 有些显色培养基还包含荧光底物,可以在紫外光下发出荧光,进一步提高检测灵敏度。
三、使用方法
1. 样品处理:
- 将待测样品进行适当的稀释和预处理。
2. 接种:
- 将处理后的样品接种到显色培养基上。
3. 培养:
- 在适宜的温度(通常是36℃±1℃)下培养一定时间(通常为18-24小时)。
4. 结果观察:
- 根据培养基的颜色变化或荧光信号判断是否存在阪崎杆菌。典型的显色反应是蓝色或绿色沉淀。
四、注意事项
1. 储存条件:
- 显色培养基应储存在避光、干燥的地方,避免高温和潮湿。
2. 有效期:
- 注意培养基的有效期,过期的培养基可能会失效或产生假阳性/阴性结果。
3. 交叉污染:
- 操作过程中要避免交叉污染,使用无菌技术和设备。
1. GHS分类:根据全球统一制度(Globally Harmonized System of Classification and Labelling of Chemicals, GHS),阪崎杆菌显色培养基通常不直接归类于危险化学品类别,因为它主要用于微生物学检测,而非化学危害。然而,其成分中的个别化学物质可能属于特定GHS类别。
2. 安全术语:
- S1:保持封闭,确保良好通风。
- S26:不慎接触眼睛,立即用大量清水冲洗并咨询医生。
- S36/37:穿戴适当的防护服和手套。
- S39:避免与眼睛、皮肤和衣物接触。
3. 风险术语:
- R22:吸入有害。
- R38:刺激皮肤。
- R41:对眼睛有严重伤害。
4. 急救措施:
- 吸入:迅速脱离现场至空气新鲜处,保持呼吸道通畅,如呼吸困难,给输氧;如呼吸停止,立即进行人工呼吸,就医。
- 皮肤接触:脱去污染的衣着,用大量流动清水彻底冲洗。
- 眼睛接触:立即翻开上下眼睑,用流动清水或生理盐水冲洗至少15分钟,就医。
- 食入:饮足量温水,催吐,就医。
5. 消防措施:
- 该培养基不易燃,但应远离火源和热源。
- 灭火剂选择:使用适合扑灭涉及物质火灾的灭火剂,如干粉、二氧化碳或泡沫灭火器。
6. 泄漏应急处理:
- 隔离泄漏区域,限制人员进入。
- 使用适当的个人防护装备清理泄漏物。
- 防止泄漏物进入水体、土壤或排水系统。
7. 废弃处置:
- 废弃物性质:根据当地法规处理。
- 废弃注意事项:避免直接排入环境,应交由合格的废物处理机构处置。
8. 安全数据表:
- 包含产品的成分、危险性、安全操作指南、急救措施、消防措施、泄漏处理和废弃方法等信息。
- 应随时可供查阅,确保使用者了解所有必要的安全信息。
1. 外观和物理性状
- 粉末均匀性和流动性:干燥培养基的粉末应均匀,具有良好的流动性,通常呈淡黄色或乳白色。
- 平板颜色:制备好的平板应呈淡黄色固体。
2. pH值
- 最终pH值:阪崎杆菌显色培养基的最终pH应在7.3±0.2范围内。
3. 微生物试验
- 质控菌株生长情况:在接种特定质控菌株后的培养过程中,阪崎肠杆菌ATCC29544应呈现蓝-绿色菌落,其他非目标菌如大肠埃希氏菌、普通变形杆菌等不应显示蓝-绿色菌落。
- 选择性:对阪崎肠杆菌具有高度选择性,能有效抑制其他杂菌的生长。
4. 灵敏度和特异性
- 灵敏度:能够准确检测出低浓度的阪崎杆菌,确保在食品和环境中的微量存在也能被检出。
- 特异性:特异性强,能区分阪崎杆菌和其他类似菌种,避免假阳性结果。
5. 稳定性和保存期
- 保存条件:制备好的平板可保存2-5天,应避免光线直接照射。干燥培养基应放置于阴暗干燥处,保存温度2-8℃,注意避光保存。
- 失效标准:干燥培养基超过保质期、结块和颜色变化都不能使用。
6. 配方成分
- 成分含量:每升培养基中包含胰蛋白胨15.0g、大豆蛋白胨5.0g、氯化钠5.0g、柠檬酸铁铵1.0g、硫代硫酸钠1.0g、脱氧胆酸钠1.0g、5-溴-4-氯-3-吲哚-α-D 葡萄糖苷0.1g、琼脂15.0g。
- 营养和抑制剂:蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;胆盐抑制革兰氏阳性菌,氯化钠维持均衡的渗透压。
7. 质量控制测试
- 生长率和特征反应:通过接种特定的质控菌株(如阪崎肠杆菌ATCC29544)并观察其生长情况和菌落颜色变化来评估培养基的质量。
- 无菌检验:确保培养基本身无菌,避免污染影响检测结果。
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